PAS（PeriodicAcid-Schiff）染色是一种常用的组织学染色技术，又称过碘酸雪夫染色。可以用来检测组织中的多糖、糖蛋白等物质。在临床实践中，有助于病理医师对疾病进行准确的判断和鉴别诊断。

核心应用领域：

1. 肿瘤病理学：肿瘤细胞通常会合成和分泌大量的糖蛋白，通过PAS染色可以观察到细胞内或细胞间的黏液样物质，帮助确定肿瘤类型。

2. 肾脏病变的诊断：PAS染色可以用于检测肾小球基底膜增厚、系膜细胞增生等病变，结合电镜检查，有助于对肾小球疾病的鉴别诊断。

3. 糖尿病视网膜病变的诊断：可以观察到视网膜血管周围的基底膜增厚和黏液样变性，判断病变的程度和类型。

4. 真菌感染的诊断：真菌细胞壁富含多糖，使用PAS染色可以将真菌细胞染成粉红色或紫红色，有助于鉴别诊断真菌感染。

5. 肝脏病理学：在肝脏组织的检查中，PAS染色可以显示肝细胞内的糖原颗粒，帮助评估肝细胞的功能状态，诊断糖原性肝病等疾病。

一、常见问题及处理办法

1．染色结果不明显或弱

【原因】样品中糖原浓度过低；酶消化不充分，存在干扰物质（如脂质或酶残留）染色剂储存不当可能会老化，降低染色效果。

【处理方法】增加样品浓度或延长染色时间以增强反应；优化酶消化步骤（如使用淀粉酶预处理）去除干扰物质；使用新鲜配制的染色剂，并遵循正确的保存操作。

2．背景染色
【原因】洗涤不充分，未去除未结合染料或污染物；试剂或设备污染（如容器、工作台杂质）。
【处理方法】每个步骤后彻底洗涤切片，使用足量缓冲液或纯水；确保实验环境清洁，使用无菌容器和工具。

3．染色结果不均匀

【原因】组织处理不均匀（如脱水、包埋不当）；细胞密度差异导致染色剂分布不均，覆盖不全。

【处理方法】标准化组织处理流程，确保固定和脱水步骤一致；调整细胞密度至均匀分布后再染色。

4．染色结果与预期不符

【原因】染色方法选择错误（如检测非糖原物质）；操作步骤错误或条件不标准（如温度、时间偏差）；样品处理不一致（如固定时间差异）

【处理方法】确认染色方法适用于目标物质，必要时结合特异性对照；严格遵循标准化操作流程，确保实验样品处理方法一致。

5．过度染色

【原因】染色时间过长；周期酸氧化浓度过高或处理时间过长。

【处理方法】按标准时间操作，定时观察染色进程；调整周期酸浓度或缩短氧化时间。

6．染色结果散漫或模糊

【原因】组织切片厚度不均；染色试剂配制错误（如稀释比例不当）。

【处理方法】使用均匀厚度的切片（建议厚度4~6微米）；按说明书准确配制染色液，避免沉淀或浓度偏差。

7．染色结果颜色偏差

【原因】PAS染色液pH值不准确；染色液浓度过高或过低。

【处理方法】校准染色液pH值（通常需控制在酸性范围）；按生产商指导配制染色液，避免浓度误差。

8．组织结构不清晰

【原因】切片质量差（如刀片损伤或折叠）脱水或包埋步骤不当。

【处理方法】优化切片技术，使用高质量切片机；规范脱水和包埋流程，控制温度与时间。

二、其他注意事项

1．染色结果缺乏对比：设置适当的对照样本，使用已知糖原含量高或低的对照样本。

2．非特异性染色：可能由污染或非糖原物质引起，需设置阴性/阳性对照，或结合其他染色方法验证，并确保使用新鲜配制的纯净染色剂，保持操作环境的清洁，避免容器交叉污染。

3．颗粒状结构：冲洗切片去除残留颗粒，染色前混匀或过滤试剂避免沉淀。

4．稳定性问题：标准化操作流程，控制试剂批次和环境条件，高碘酸处理温度以不高于20°C为宜，室温高时，处理时间可适当缩短。Schiff染液染色时间可随温度调整，室温高可减少染色时间，冬季室温低，可延长至20分钟左右。

文章出自：验外实包   想了解更多请关注：http://www.dj-cro.com/